Producten

Koolzuuranhydrase-activatoren: de eerste activeringsstudie van de menselijke secretoire isovorm VI met aminozuren en amines.

Het secretoire isozym van humaan koolzuuranhydrase (hCA, EC 4.2.1.1), hCA VI, is gekloond, tot expressie gebracht en gezuiverd in een bacterieel expressiesysteem.De kinetische parameters voor de CO(2)-hydratatiereactie toonden aan dat hCA VI ak(cat) van 3,4 x 10(5)s(-1) en k(cat)/K(M) van 4,9 x 10(7)M bezit (-1)s(-1) (bij pH 7,5 en 20 graden C).hCA VI heeft een significante katalytische activiteit voor de fysiologische reactie, van dezelfde orde van grootte als de alomtegenwoordige isovorm CA I of het transmembraan, tumor-geassocieerde isozym CA IX.Een reeks aminozuren en amines bleek te werken als CA VI-activatoren, met variabele werkzaamheid.l-His, l-Trp en dopamine vertoonden zwakke CA VI-activerende effecten (K(A)s in het bereik van 21-42 microM), terwijl d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, serotonine , en sommige pyridyl-alkylaminen waren betere activatoren, met K(A)s in het bereik van 13-19 microM.De beste CA VI-activatoren waren l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-amino-l-Phe en histamine, met K(A)s in het bereik van 1,23-9,31 microM.Al deze activatoren versterken k(cat), hebben geen effect op K(M), en nemen dus deel aan de snelheidsbepalende stap in de katalytische cyclus, de protonenoverdrachtsreacties tussen de actieve plaats van het enzym en de omgeving.