Producten

De Tet 5-methylcytosine dioxygenasen katalyseren DNA-demethylering door 5-hydroxymethylcytosine en andere geoxideerde producten te produceren.Tet1 en Tet2 komen sterk tot expressie in pluripotente muizencellen en worden in verschillende mate verlaagd in somatische cellen, maar de transcriptiemechanismen zijn onduidelijk.Hier hebben we de promotor- en versterkerdomeinen in Tet1 en Tet2 gedefinieerd.Binnen een "superenhancer" van 15 kb van Tet1 zijn er twee transcriptiestartsites (TSS's) met verschillende activeringspatronen tijdens de ontwikkeling.Een promotorgebied van 6 kb stroomopwaarts van de distale TSS is zeer actief in naïeve pluripotente cellen, rapporteert autonoom Tet1-expressie in een transgeen systeem en ondergaat snel DNA-methylering en silencing na differentiatie in gekweekte cellen en natieve epiblast.Een tweede TSS stroomafwaarts, geassocieerd met een constitutief zwakke CpG-rijke promotor, wordt geactiveerd door een naburige versterker in naïeve embryonale stamcellen (ESC's) en geprimede epiblastachtige cellen (EpiLC's).Tet2 heeft een CpG-eilandpromoter met pluripotentie-onafhankelijke activiteit en een ESC-specifieke distale intragene versterker;de laatste wordt snel neerwaarts gereguleerd in EpiLC's.Onze studie onthult verschillende vormen van transcriptionele regulatie bij Tet1 en Tet2 tijdens overgangen van celtoestanden in de vroege ontwikkeling.Nieuwe transgene reporters die Tet1- en Tet2-cis-regulerende domeinen gebruiken, kunnen dienen om genuanceerde veranderingen in pluripotente toestanden en de onderliggende epigenetische variaties te onderscheiden.