Producten

De huidige studie beschrijft een eenvoudige en efficiënte methode waarbij gebruik wordt gemaakt van hogedrukvloeistofchromatografie (HPLC) gekoppeld aan fluorescentiedetectie voor de bepaling van kinetische parameters van glutamaatopname in zenuwweefsel.Netvliesweefsel verkregen van 7 dagen oude kuikens werd geïncubeerd met bekende concentraties glutamaat (50-2000 μM) gedurende 10 minuten, en de niveaus van de o-ftaldehyd (OPA)-gederivatiseerde neurotransmitter in het incubatiemedium werden gemeten.Door het verschil tussen begin- en eindconcentraties van glutamaat in het medium te beoordelen, werd een verzadigbaar opnamemechanisme gekarakteriseerd (K(m)=8,2 en V(max)=9,8 nmol/mg eiwit/min).Deze maatregel was grotendeels natrium- en temperatuurafhankelijk, wat sterk ondersteunt dat het mechanisme voor concentratieverlagingen inderdaad opname is door transporters met hoge affiniteit.Bovendien toonden onze resultaten ook aan dat zinkchloride (een remmer van glutamaat/aspartaattransporters) een concentratie-afhankelijke afname van glutamaatopname veroorzaakte, wat de specificiteit van onze methodologie aantoont.Over het algemeen kenmerkt het huidige werk een alternatieve methodologie om de opname van glutamaat in zenuwweefsel te evalueren met behulp van HPLC.Deze aanpak zou een belangrijk hulpmiddel kunnen zijn voor studies die verband houden met de karakterisering van minieme veranderingen in glutamaattransport gerelateerd aan letsel aan het centrale zenuwstelsel.