Producten

CTP:fosfocholine cytidylyltransferase α (CCTα) is een nucleair enzym dat de snelheidsbeperkende stap in de CDP-choline-route voor de synthese van fosfatidylcholine (PC) katalyseert.Lipide-activering van CCTa resulteert in de translocatie ervan naar de nucleaire envelop en uitbreiding van een intranucleair membraannetwerk dat het nucleoplasmatisch reticulum (NR) wordt genoemd door een mechanisme waarbij membraanvervorming betrokken is.Nucleaire lamina's zijn ook vereist voor stabiliteit en proliferatie van de NR, maar of deze unieke structuur, of de nucleaire lamina in het algemeen, vereist is voor PC-synthese is niet bekend.Om deze relatie te onderzoeken, werd de nucleaire lamina uitgeput door RNAi of verstoord door expressie van het Hutchinson-Gilford progeria-syndroom (HGPS) mutant lamin A (progerin), en het effect op CCTa en cholinemetabolisme werd geanalyseerd.siRNA-gemedieerde uitschakeling van lamin A/C of lamin B1 in CHO-cellen om de NR te verminderen had geen effect op de pc-synthese, terwijl dubbele knockdown niet-specifiek de route remde.Ter bevestiging van zijn ondergeschikte rol in PC-synthese, werd slechts 10% van de tijdelijk tot overexpressie gebrachte choline/ethanolaminefosfotransferase gedetecteerd in de NR.In CHO-cellen was CCTa nucleoplasmatisch en co-gelokaliseerd met GFP-progerine in nucleaire plooien en invaginaties;HGPS-fibroblasten vertoonden echter een abnormale verdeling van CCTa in het cytoplasma en de nucleaire envelop die gepaard ging met een tweevoudige vermindering van de pc-synthese.Ondanks de gewijzigde lokalisatie toonden choline-labeling-experimenten aan dat de CCT-activiteit niet werd beïnvloed, en remming van PC-synthese werd herleid tot verminderde activiteit van een hemicholinium-gevoelige choline-transporter.We concluderen dat CCTa en lamins specifiek samenwerken om de NR te vormen, maar de algehele structuur van de nucleaire envelop heeft een minimale impact op CCT-activiteit en PC-synthese.