Producten

Effecten van detergentia op P-glycoproteïne-atpase-activiteit: verschillen in verstoringen van basale en verapamil-afhankelijke activiteiten.

P-glycoproteïne (P-gp), een plasmamembraan-glycoproteïne geassocieerd met het multidrugresistentie-fenotype, is verantwoordelijk voor de ATP-afhankelijke efflux van verschillende amfifiele geneesmiddelen.Met behulp van membraanblaasjes bereid uit de multidrug-resistente cellijn DC-3F/ADX, bestudeerden we de verstoring van de basale (dwz in afwezigheid van geneesmiddel) en verapamil-afhankelijke P-gp ATPase-activiteiten geïnduceerd door verschillende detergentia, bij niet-oplosbaarmakend, evenals bij oplossende concentraties.De progressieve membraanoplosbaarheid met toenemende wasmiddelconcentratie werd gevolgd door lichtverstrooiing en centrifugatie-experimenten.Voor niet-oplosbaarmakende wasmiddelconcentraties induceerden alle geteste wasmiddelen behalve DOC een gedeeltelijke remming van P-gp ATPase-activiteit, die niet gecorreleerd was met de hoeveelheid van de verschillende geteste wasmiddelen die in de membranen waren opgenomen.Analyse van de door verapamil geïnduceerde P-gp-activering onthult dat P-gp-ATPase-activiteit op verschillende manieren wordt gemoduleerd door de verschillende detergentia bij niet-oplosbaarmakende concentraties.Het is dus waarschijnlijker dat specifieke interacties tussen P-gp en detergentia optreden in plaats van een globale membraanverstoring.Na solubilisatie door de verschillende geteste detergentia, werd de basale P-gp ATPase-activiteit vrijwel volledig geremd, behalve in aanwezigheid van CHAPS dat deze activiteit kon behouden op een niveau dat vergelijkbaar is met dat gemeten in natieve membranen.De door verapamil geïnduceerde P-gp ATPase-activering ging echter verloren tijdens het oplossen van P-gp door CHAPS, maar werd hersteld na verdunning van CHAPS tot onder de kritische micellaire concentratie.Deze waarnemingen duiden op specifieke interacties tussen P-gp- en CHAPS-moleculen binnen de gemengde micellen.Over het algemeen zijn onze gegevens die specifieke interacties van P-gp/detergentia aantonen, consistent met de locatie van de geneesmiddeltransportplaatsen op P-gp-transmembraandomeinen.