Producten

PIPES [piperazine-N,N′-bis(2-ethaansulfonzuur)] wordt vaak gebruikt als buffermiddel in de biochemie.Het is een ethaansulfonzuurbuffer ontwikkeld door Good et al.In de jaren 1960.PIPES heeft een pKa in de buurt van de fysiologische pH, waardoor het nuttig is bij celkweekwerk.Er is gedocumenteerd dat het lipidenverlies minimaliseert bij het bufferen van glutaaraldehydehistologie in planten- en dierenweefsels. Een buffermiddel met een pKa die bijna fysiologisch is.

Antimicrobieel peptide magainin 2 vormt poriën in lipidemembranen en induceert membraanpermeatie van de cellulaire inhoud.Hoewel deze permeatie waarschijnlijk de belangrijkste oorzaak is van zijn bacteriedodende activiteit, blijft het mechanisme van porievorming slecht begrepen.Daarom hebben we de interactie van magainin 2 met lipidemembranen in detail onderzocht met behulp van enkele gigantische unilamellaire blaasjes (GUV's).De binding van magainin 2 aan het lipidemembraan van GUV's verhoogde de fractionele verandering in het gebied van het membraan, δ, die evenredig was met de oppervlakteconcentratie van magainin 2, X. Dit geeft aan dat de snelheidsconstante van de magainin 2-geïnduceerde twee -toestandsovergang van de intacte toestand naar de porietoestand nam sterk toe met een toename van δ.De spanning van een lipidemembraan na aspiratie van een GUV activeerde ook door magainine 2 geïnduceerde porievorming.Om de locatie van magainin 2 te onthullen, werd de interactie van met carboxyfluoresceïne (CF) gelabeld magainin 2 (CF-magainin 2) met enkele GUV's met een in water oplosbare fluorescentiesonde, AF647, onderzocht met behulp van confocale microscopie.Bij afwezigheid van spanning als gevolg van aspiratie nam na de interactie van magainin 2 de fluorescentie-intensiteit van de GUV-rand als gevolg van CF-magainin 2 snel toe tot een constante waarde, die lange tijd constant bleef, en op 4-32 s ervoor het begin van lekkage van AF647 begon de randintensiteit snel toe te nemen tot een andere constante waarde.Daarentegen werd in de aanwezigheid van de spanning geen toename van de velgintensiteit waargenomen vlak voor het begin van de lekkage.Deze resultaten geven aan dat magainin 2 pas vlak voor de porievorming van de buitenste naar de binnenste monolaag kan verplaatsen.Op basis van deze resultaten concluderen we dat een door magainin 2 geïnduceerde porie een door rek geactiveerde porie is en dat de rek van de binnenste monolaag een belangrijke drijvende kracht is achter de porievorming.