Producten

1.Metabolietprofileringsmethoden zijn belangrijke hulpmiddelen voor het meten van metabolietpools in biologische systemen.Hoewel de meeste metabolietprofileringsmethoden relatieve intensiteiten rapporteren of afhankelijk zijn van enkele interne standaarden die alle metabolieten vertegenwoordigen, is de uiteindelijke vereiste voor een kwantitatieve beschrijving van de metabolietpool in biologische cellen en vloeistoffen de bepaling van de absolute concentratie.We rapporteren hier een high-throughput en gevoelige gaschromatografie/tandem massaspectrometrie (GC/MS/MS) gerichte metabolietprofileringsmethode die absolute kwantificering van alle gedetecteerde metabolieten mogelijk maakt.De methode is gebaseerd op methylchloorformiaatderivatisering en kwantificering door monsters te verrijken met metabolietstandaarden die afzonderlijk zijn gederivatiseerd met gedeutereerde derivatiseringsreagentia.De traditionele elektronenimpactionisatie wordt vervangen door positieve chemische ionisatie, aangezien deze laatste in veel grotere mate het moleculaire ion en andere fragmenten met een hoog molecuulgewicht behouden.Dit maakte het gemakkelijker om unieke MS/MS-overgangen te selecteren uit de vele co-eluterende metabolieten.Momenteel omvat de nieuwe GC/MS/MS-methode 67 algemene primaire metabolieten, waarvan de meeste behoren tot de groepen van amino- en niet-amino-organische zuren.We laten de toepasbaarheid van de methode zien op urine- en serummonsters.De methode is een aanzienlijke verbetering van de huidige methodologie voor kwantitatieve GC/MS-metabolietprofilering van aminozuren en niet-amino-organische zuren.

2.24S-Hydroxycholesterol (24OHC) en 27-hydroxycholesterol (27OHC) zijn twee structureel vergelijkbare oxysterolen van verschillende oorsprong - de eerste wordt bijna uitsluitend in de hersenen gevormd en de laatste wordt in mindere mate in de hersenen gevormd dan in de meeste andere organen.TE TESTEN HYPOTHESE: Neuronale schade en/of demyelinisatie veroorzaakt een verhoogde flux van 24OHC van de hersenen naar de cerebrospinale vloeistof (CSF), terwijl een defecte bloed-hersenbarrière een verhoogde flux van 27OHC van de circulatie naar de CSF veroorzaakt. Isotopenverdunningsmassa spectrometrie werd gebruikt om de twee oxysterolen in CSF en plasma van meer dan 250 patiënten met verschillende neurologische en geriatrische ziekten te testen. De CSF-niveaus van de twee oxysterolen werden veel meer beïnvloed door de verschillende ziekten dan de plasmaspiegels.Patiënten met actieve demyeliniserende ziekten hadden verhoogde niveaus van 24OHC in CSF met een relatief hoge 24OHC/27OHC-ratio.Patiënten met meningitis hadden over het algemeen hoge niveaus van beide steroïden met een lage 24OHC/27OHC-ratio.Patiënten met de ziekte van Alzheimer hadden licht verhoogde niveaus van 24OHC in CSF met minder toename van 27OHC.Patiënten met multiple sclerose hadden de neiging om tijdens actieve periodes hogere niveaus van 24OHC te hebben met een hoge 24OHC/27OHC-ratio. Metingen van de twee oxysterolen in CSF en plasma kunnen een belangrijke bijdrage leveren aan bestaande biochemische methoden voor de evaluatie van neurologische aandoeningen.