Producten

Biologische activiteit: BCIP (BCIP p-toluïdinezout; X-fosfaat p-toluidinezout) is een chromogeen substraat voor colorimetrische detectie van activiteit van alkalische fosfatase.

Shiga-toxinen (Stxs) worden geproduceerd door enterohemorragische Escherichia coli (EHEC), die menselijke infecties veroorzaken met vaak een dodelijke afloop.Vero-cellijnen, afgeleid van de nier van de Afrikaanse groene aap, vertegenwoordigen de gouden standaard voor het bepalen van de cytotoxische effecten van Stxs.Ondanks hun wereldwijde gebruik, is de kennis over de exacte structuren van de Stx-receptorglycosfingolipiden (GSL's) en hun assemblage in lipide-opeenhopingen slecht.Hier presenteren we een uitgebreide structurele analyse van Stx-receptor-GSL's en hun distributie naar wasmiddelbestendige membranen (DRM's), die werden bereid uit Vero-B4-cellen en gebruikt als lipide-vlot-equivalenten.We identificeerden globotriaosylceramide (Gb3Cer) en globotetraosylceramide (Gb4Cer) als de GSL-receptoren voor Stx1a-, Stx2a- en Stx2e-subtypen met behulp van TLC-overlaydetectie in combinatie met MS.De ongebruikelijke Stx-receptor, globopentaosylceramide (Gb5Cer, Galβ3GalNAcβ3Galα4Galβ4Glcβ1Cer), die specifiek werd herkend (naast Gb3Cer en Gb4Cer) door Stx2e, was volledig structureel gekarakteriseerd.Lipovormen van Stx-receptor-GSL's bleken voornamelijk ceramide-eenheden te bevatten die waren samengesteld uit sfingosine (d18:1) en C24:0/C24:1- of C16:0-vetzuren.Bovendien suggereerde gelijktijdig voorkomen met lipide-vlot-markers, SM en cholesterol, in DRM's GSL-associatie met membraanmicrodomeinen.Deze studie vormt de basis voor het verder onderzoeken van de functionele impact van lipide-vlot-geassocieerde Stx-receptoren voor toxine-gemedieerde schade van Vero-B4-cellen.